黎长征（广西大化瑶族自治县人民医院 广西大化 530800）
【关键词】尿常规 尿液分析仪 显微镜检查
尿液是血液通过肾小球滤过、肾小管和集合管的重吸收及排泄产生的代谢产物[1]。尿液在调节水、电解质、酸碱平衡及排泄废物中起到十分重要的作用，由于血液与全身各组织、器官的密切关系，因此尿液的组成和性状可反映机体代谢情况及各系统功能状态，尤其与泌尿系统疾病直接有关。尿液检验又称尿液分析，是泌尿系统进行疾病诊断、疗效及预后判断的首选项目[2]。
尿液一般检验主要包括传统的物理学（肉眼）检查、化学检查和显微镜检查。现代尿液一般检验以尿干化学试带和尿液化学分析仪方法替代传统的化学检查，具有快速正确的优点，但不能代替传统的尿沉渣显微镜检查[3]。现代尿液检验方法，尚有放射免疫法、尿酶联免疫法、色谱法、分子生物学法、电镜法、流式细胞仪法等多种检验方法，可检测尿中各种蛋白、氨基酸、酶、激素、抗体、细胞因子等，对诊断疾病及估计治疗效果起了十分重要的作用[4]。
1 尿沉渣显微镜检查
此项检查是尿常规检查中的重要项目之一。尿沉渣检查是用显微镜对尿沉淀物进行检查，识别尿液中细胞、管型、结晶、细菌、寄生虫等各种病理成份；辅助对泌尿系统疾病作出诊断、定位、鉴别诊断及预后判断的重要常规试验项目[5]。在一般性状检查或化学试验中不能发现的变化，常可通过沉渣检查来发现。尿沉渣检查可分为非染色尿沉渣镜检、染色尿沉渣镜检和尿沉渣定量检查。非染色尿沉渣镜检，应取混匀新鲜尿液，直接涂片或取10ml尿离心（水平式离心机、离心半径15cm，1500r/min，378G）离心5min后弃去上清液，留下0.2ml沉渣，轻摇离心管，使沉渣有形成并充分混匀，取尿沉渣20ul，滴入载玻片上，用18 18mm的盖玻片覆盖。尿沉渣镜检观察，用10 10镜头，观察其中有形成份的全貌和管型。用10 40镜头观察鉴定细胞成份和计算数量，应观察10个视野所见最低和最高值，再计算出平均每一个视野的数值，记录结果。管型用高倍镜鉴定，但计数数量按低倍镜观察20个视野，算出平均一个视野平均值，记录结果。参考值：①细胞成份；每高倍镜视野所见的最低～最高值；红细胞0～3/HP；白细胞0～5/HP。②管型（透明）：每低倍镜视野平均值0～1/全片。③尿结晶和盐类数量以每一高倍视野（+）、（2+）、（3+）、（4+）报告[2]。染色尿液沉渣镜检可分为离心法及混匀一滴尿法。离心法敏感，检测阳性率高，为目前住院病人，尤其是内科和泌尿科病人常规检测方法，但其手续繁琐、费时，且因操作条件不同，如离心的尿量、转速和时间、保留尿沉渣体积等不同而使结果不一致[6]。混匀一滴尿法简单易行，但阳性率低，易漏诊，常用于非泌尿系统疾病的过筛检查，除明显混浊的血尿、脓尿外应强调用离心法，用染色时透明管型不易漏检，也有助于其它细胞成份结构观察。尿沉渣定量检查，其方法为过筛法和一小时尿沉渣计数。过筛法主要留取病人新鲜晨尿，混合后直接滴入血细胞计数池内，计数5大格中红细胞、白细胞、上皮细胞及管型数，结果 2得出每ul内的数。参考值：正常人每ul新鲜尿中红细胞、白细胞、小圆上皮细胞为0～2/ul，超过了2～5/ul为可疑，＞10/ul为阳性。1小时尿沉渣计数，其方法为：患者先排尿弃去，准确收集3小时尿液于清洁干燥容器内送检，准确测量3小时尿量，充分混合。取混匀尿液10ml，置刻度离心管中，1500r/min离心5min，用吸管吸弃上层尿液9ml，留下1ml，充分混匀。吸收混匀尿液1滴，注于血细胞计数板内。细胞共数十大方格，管型计数20个大方格。参考值：红细胞0～100000/1小时尿；白细胞0～200000/1小时尿，管型＜3400/1小时尿[7]。
对尿沉渣有形成份的识别除了应用普通光学显微镜之外，还可用偏差显微镜、位相显微镜、荧光显微镜进行检测。尿沉渣显微镜检查以它独特的临床价值仍是尿液分析中不可缺少的检查手段[8]。但由于尿沉渣操作费时，在大批量标本检查时，特别是门诊病人急需试验结果时，每个标本都经严格操作得出沉渣报告是困难的，因此需要找一个简单、快速的方法进行筛选，将完全正常的标本筛出后，有利于对异常的标本进行规范性检查，干化学尿液分析提供了筛选的试验手段[9]。
2 尿液自动化学分析仪
现代科学技术的发展，使尿液化学分析实现了自动化，在尿液化学分析仪上运用多联尿干化学试带可同时检测尿液中10多种化学成分。干化学分析是利用液体标本直接加到干燥试剂上，以标本中水为溶剂引起特定化学反应的方法。可同时测定尿PH、尿蛋白质、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、白细胞、比密等[10]。近年来11联尿试带也已问世，增加了除上述10项外的抗坏血酸项目，来反映尿中维生素C的含量。尿液自动化学分析仪工作的基本原理是反射光度法。即用尿干化学分析试带与尿中相应化学成份反应，当该产生颜色变化的试带，被波长不同的发光二极管照射后，产生反射光。反射光由光电管接受，光信号转化成为电讯号，电讯号传送至模拟数字转换器，转换成数值，经微处理控制器处理，自动显示结果。通常试带颜色深浅与被测中物质在一定浓度范围内成正比，而与反射光的强度成反比[11]。其操作方法为：吸取混匀尿液约10ml，在尿分析仪上作尿化学10项测定，测试完毕后，标本再以1500r/min离心沉淀5min，弃去上清液，取沉渣约0.2ml涂片镜检。尿干化学分析仪参考范围：PH5～7，比重（SG）1.015～1.025；蛋白质（pro）阴性；葡萄糖（GLU）阴性；酮体（KET）阴性；胆红素（BIL）阴性；亚硝酸盐（NIT）阴性；白细胞（LEU）阴性；红细胞阴性：维生素C 20～100mg/L。尿液自动化学分析仪操作简便、快速、准确、结果可靠，在许多国家已经把它作为常规方法在临床检验中广为应用[12]。开机平衡后几分钟即可报告结果，故极适合用于急诊标本。另外，由于干化学分析除了仪器和干片外，无需贮备任何其它试剂和配制任何溶液，故对于相对独立的门诊部或诊所及病人的床头检查和家庭监护，这类仪器极为适用。但也有其缺点，如果使用不当或许多中间环节及影响因素都将直接影响自动化分析结果的准确性，不仅会引起实验结果的误差，甚至延误诊断，因此要求操作者对自动化仪器的原理、性能、注意事项及影响因素等方面的知识有充分了解，正确使用自动化仪器，这样才能使尿液分析仪得出的结果更可靠、准确[13]。自动分析也不能完全取代涂片镜检，尤其是管型、红细胞、脓细胞、结晶等可能漏检或不正确，所以说不能完全依赖尿液分析仪，必须结合镜检，才能纠正分析仪不能检出的结果，为临床提供正确报告，故镜检在尿检查中是十分重要的[14]。
3 全自动尿液分析仪
目前尿沉渣检查多采用人工显微镜检查作为主要检测手段，然而其遇到的首要问题是方法如何统一，镜检如何标准化。在整个手工镜检过程中，取多少尿离心，离心力大小，离心时间长短，最后剩下多少沉渣物，取多少镜检；所加盖玻片的面积，显微镜放大倍率、观察多少视野及报告方式等，国内外很不一致。同时由于尿标本成分复杂、成分鉴别的主观性、尿沉渣的报告方式不统一、尿沉渣参考值不一致等原因，使得检测结果由于报告速度慢、检验人员劳动强度大，检测结果个体误差大、重复性较差而无法满足临床的要求[15]。SYSMEX公司研制生产的全自动尿有形成份分析仪UF-100在这样的背景下应运而生，由于它具有手工操作无法比拟的重要精度，可以完全自动地对尿液中各有形成份作模拟鉴别和计数，并能获得多项更客观而有效的分析结果，其定量报告可有助于临床的疗效监控。其对红细胞形态的鉴别可有助于临床了解泌尿系统出血部位以及仪器的高检测效率等多方面的先进性与优越性，而成为尿沉渣检查筛选手段的首选工具[16]。UF-100全自动尿有形成份分析仪采用先进的激光流式细胞检测技术及荧光染色技术，并与电阻抗测定法结合对尿有形成份进行直接鉴别及计数，使自动化尿检获得了重大突破。UF-100装备有综合性数据提示信号系统，可协助操作员迅速确定需要复查的标本。由用户定义的数据提示信号还可以设定需要的分析灵敏度，帮助检测可疑标本，为临床提供有用信息。触摸感应式的彩色液晶屏幕不仅可以显示数据，同时还可以输入字母及数据，分析操作只需将标本架设置在所定的位置上，按下按钮，便可启动自动分析功能，使实验室具有卓越的效率。UF-100还具有综合质量控制程序，备有12个文件及每个定量参数的180个数据，提供可信赖的监控系统，以保证最佳性能。可存储1000个标本的散射图和直方图，还包含标本的物理化学特性的综合数据。双向连接口能够实现测试指令与主机及化学定性检查装置之间的全自动通讯，从而建立了一个可靠的多功能工作站[17]。UF-100测定原理为：吸入800ul尿液后自动加以稀释和混合，并对细胞、细菌等有形成份作特异性染色，通过加压使细胞进入充满鞘液的流室。因鞘液的约束下细胞排成单列，经流室喷嘴喷出，形成的细胞柱与激光束垂直相交，使激活的细胞产生荧光。流式细胞入口两端电极间的恒定直流电使有形成份通过时产生与细胞大小呈正比的电阻变化。通过测定前向散射光、荧光的波幅和强度及电阻抗的变化报告12个参数，对细菌、白细胞等5种有形成分进行分析[18]。UF-100操作简便，检测速度快，无需离心标本，仅需70s便可生成打印的检验报告，每小时能完成100份标本的检测，可使临床医生在第一时间段获得尿液检查的有关信息，但也有假阳性、假阴性结果，还不能完全取代传统显微镜镜检，虽可用于临床尿路感染的筛检，但不可替代定量细菌培养。
综上所述，尿流式沉渣分析、尿干化学与传统手工操作是三种完全不同原理的分析方法，虽然都能分析尿中红细胞、白细胞、蛋白质、细菌等，但由于原理不同，结果肯定不一致。只有认识了它们的原理，才能正确理解认识这种差异[19]。无论上述哪一种方法，都不能说是很完善的筛检方法。但相比较而言，UF-100假阴性率最低，且检测速度快，相对于尿沉渣镜检或试纸法来说，UF-100筛检效果较好，能满足对阳性标本作进一步的病原体分离培养、鉴定及药敏试验的需求。若结合干化学试带和镜检，可以为临床提供更多、更准确的信息。
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